现在对武汉等10多个地区都在进行新冠病毒IgG抗体检测,对国外归国人员及一些复工复产单位的员工也进行检测,如果阳性一般提示感染过新冠病毒,但是确实会有假阳性,就是没感染过新冠病毒,但结果提示感染过香港验血出现假阴性。

香港验血出现假阴性:新冠血清检测单igg存在假阳性吗?

坦率地讲,这种假阳性很难完全避免,需要对结果进行科学的解读与认识,一般也需要结合IgM抗体进行动态检测。

香港验血出现假阴性:新冠血清检测单igg存在假阳性吗?

造成特异IgG免疫测定假阳性,通常有以下两方面的原因:

1.阳性判断值附近的弱阳性,可能是假阳性检测判断阳性与阴性,会设定一个分界值,高于这个值判断为阳性,一些刚刚高于阳性判断值附近的弱阳性,很多并不一定就是阳性,有可能就是假阳性;

胶体金试纸条检测是通过肉眼观察颜色有否来判断阳性和阴性,不存在阳性判断值的问题,但也会存在不同检测者判断的差异。

化学发光免疫试验(CLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)需要设定阳性判断值,一般是通过测定大量的阴性人群(数千份)和一定数量(数百份)的已知阳性人群标本,得到一个分布,用统计学方法确定阳性判断值,通常为假阳性和假阴性均较低且达到平衡状态时的测定信号,如OD值或发光值。

因此,不可避免地处于其周边阳性一侧的结果,会有一部分弱阳性,而实际为假阳性。

依据阴性和阳性人群检测值的分布确定阳性判断值

2.血样中存在导致假阳性的干扰物质1)内源性干扰物

一般包括类风湿因子、嗜异性抗体、补体、因使用鼠源抗体治疗或诊断诱导的抗鼠Ig 抗体等。在日常的临床血清(浆)标本中,有相当比例的标本不同程度的含有上述各种干扰物质,从而可能导致测定结果的假阳性。

(1)类风湿因子(Rheumatoid factors,RF)

在类风湿患者、其他疾病包括部分正常人血清中,常含有较高或不同浓度的类风湿因子,其通常为IgM型,亦有IgG和IgA型,RF具有与变性IgG产生非特异结合的特点,因此在免疫测定中,其可与固相上包被的特异抗体IgG以及随后加入的标记的特异抗体IgG结合,从而出现假阳性结果。

(2)嗜异性抗体(Heterophilicantibodies)

人类血清中可能会含有抗啮齿类动物(如鼠、马、羊等)的抗体,即天然嗜异性抗体。有研究表明,天然的嗜异性抗体(IgG)可分为两类,一类(85%的假阳性由其引起)可结合于山羊、小鼠、大鼠、马和牛IgG的Fab区域,但不与兔IgG的Fab区结合。另一类(15%的假阳性由其引起)可结合于小鼠、马、牛和兔IgG的FC区表位,但不与山羊和大鼠IgG的FC区表位结合。嗜异性抗体可通过交联固相和标记的单抗或多抗而出现假阳性反应。

(3)补体

在固相免疫测定中,来自哺乳动物的固相特异抗体和标记二抗均可以激活人补体系统。因为其在固相吸附及结合过程中,抗体分子发生变构, Fc段的补体C1q结合位点被暴露出来,这样C1q就成为一个中介物将二者交联起来,从而出现假阳性结果。

(4)因使用鼠抗体治疗或诊断诱导的抗鼠Ig抗体

在临床上,有使用鼠源性单克隆抗体进行癌症等的靶向治疗,或者使用放射性核素标记鼠源性单克隆抗体进行影像诊断等,均有可能使相应患者体内产生抗鼠抗体。这种抗鼠抗体对使用鼠源性单克隆抗体的免疫测定,可产生假阳性结果。

(5)溶菌酶

溶菌酶可与等电点较低的蛋白有强的结合能力。免疫球蛋白等电点约为5,因此,在免疫测定中,溶菌酶可在包被的IgG和标记的IgG间形成桥接,从而导至假阳性。

2)外源性干扰物

包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长和标本凝固不全等。

(1)标本溶血

如果样本中的红细胞破了,溶血导致血红蛋白释放,由于血红素基团有类似过氧化物的活性,因此,在以辣根过氧化物酶(HRP)为标记酶的ELISA和CLIA中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其在温育过程中会吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色或发光,导至假阳性。

(2)标本贮存时间过长

标本在2~8℃下保存时间过长,IgG可聚合成多聚体,在间接法免疫测定中会导致本底过深、甚至造成假阳性。